Эдвард Дженнер/Пекселс
Согласно презентации, представленной на прошлой неделе на ежегодном собрании Американского общества генной и клеточной терапии (American Society of Gene & Cell Therapy annual meeting), терапия генного редактирования на основе CRISPR под названием EBT-101 была безопасной и хорошо переносилась, но не предотвратила рецидив вируса у трех участников, которые прекратили антиретровирусное лечение в начале исследования.
Как ранее сообщал aidsmap, исследователи представили результаты на конференции в октябре прошлого года, которые показали, что EBT-101 хорошо распределялся в организме и не вызывал серьезных побочных эффектов у первых трех участников исследования, получавших лечение. Хотя в презентации не было данных о том, действительно ли лечение помогает бороться с ВИЧ, это не помешало Daily Mail заявить, что до излечения от ВИЧ “могут пройти месяцы” – одно из многих преувеличенных заявлений о состоянии исследований в области лечения ВИЧ за последние годы.
Но сейчас эти данные опубликованы, и новости в целом неутешительные. Препарат EBT-101 не поддерживал подавление вирусной активности ВИЧ при использовании в первоначальной протестированной дозе, хотя, возможно, у одного из участников он замедлил восстановление вирусной активности. Кроме того, его хороший профиль безопасности позволяет предположить, что аналогичные подходы CRISPR могут быть применимы и к другим латентным вирусным инфекциям, таким как простой герпес и гепатит В.
“Мы знаем, что многие люди надеялись, что первое испытание сможет предоставить доказательства возможного излечения от ВИЧ, потому что в этой области лечения ждали более 20 лет”, – сказал старший вице-президент Excision BioTherapeutics доктор Уильям Кеннеди в пресс-релизе. “Однако было важно, чтобы это клиническое испытание подтвердило безопасность EBT-101 в качестве продукта генной терапии, а также безопасность, связанную с использованием CRISPR в полевых условиях”.
CRISPR для ВИЧ
Антиретровирусная терапия может подавлять репликацию ВИЧ на неопределенный срок, но вирус внедряет свои генетические схемы в ДНК клеток человека и создает долговременный резервуар, недоступный лекарствам. Эта интегрированная ДНК ВИЧ находится в состоянии покоя в покоящихся Т-клетках во время лечения, но при прекращении приема антиретровирусных препаратов она может начать продуцировать новый вирус, что делает излечение практически невозможным. Единственный способ определить, приводит ли экспериментальное вмешательство к длительной ремиссии, – это прекратить антиретровирусную терапию при тщательном наблюдении во время аналитического перерыва в лечении.
Профессор Камель Халили из Университета Темпл в Филадельфии и его коллеги уже более десяти лет изучают генную терапию с целью лечения ВИЧ. В их работе используется технология CRISPR/Cas9, которую иногда называют “молекулярными ножницами”, – технология, которая сочетает в себе направляющие РНК, расположенные на определенных сегментах ДНК, и фермент нуклеазу, который разрезает генетический материал в нужном месте.
В 2014 и 2016 годах исследователи сообщали, что инструмент CRISPR/Cas9 может вырезать гены ВИЧ из клеток CD4 в ходе лабораторных исследований. Исследование, опубликованное в 2019 году, показало, что этот подход может удалить интегрированные гены ВИЧ и очистить латентные вирусные резервуары у мышей. А на конференции по ретровирусам и оппортунистическим инфекциям 2019 года команда Университета Темпл сообщила, что терапия CRISPR/Cas9 успешно удалила сегменты ВИЧ-подобного вируса из вирусных резервуаров у обезьян.
Это исследование привело к разработке EBT-101, терапии на основе CRISPR, которая осуществляется с помощью аденоассоциированного вирусного вектора, использующего две направляющие РНК для воздействия на три участка интегрированного генома ВИЧ. Вырезание этих участков предотвращает образование нового интактного вируса. В августе прошлого года исследователи сообщили, что однократная доза обезьяноподобной версии терапии безопасно и эффективно устраняла интегрированную ВМС у обезьян, получавших антиретровирусную терапию. Но это исследование не включало в себя прерывание лечения, поэтому оно не могло показать, были ли животные функционально вылечены.
В 2022 году началось первое клиническое испытание EBT-101 на людях (NCT05144386), в ходе которого проводилась проверка терапии на людях, получающих антиретровирусную терапию, со стабильной неопределяемой вирусной нагрузкой. Компания Excision объявила, что первый участник исследования фазы I/II получил EBT-101 в июле этого года, и протокол исследования предусматривал, что участники, у которых сохранялась вирусная супрессия в течение 12 недель после получения генной терапии, должны были прервать аналитическое лечение.
На конференции, прошедшей на прошлой неделе, доктор Рэйчел Прести из медицинской школы Вашингтонского университета в Сент-Луисе представила обновленные результаты исследования. Из пяти участников, получивших однократную инфузию начальной дозы EBT-101, трое прекратили антиретровирусную терапию. У всех троих вирус восстановился, и им пришлось возобновить прием антиретровирусных препаратов. Вероятно, это произошло потому, что генная терапия затронула не все клетки, содержащие латентный ВИЧ, и даже очень небольшого количества клеток, содержащих остаточную ДНК ВИЧ, достаточно для восстановления репликации вируса.
У одного реципиента EBT-101 вирусная супрессия сохранялась в течение 16 недель после прекращения лечения, что значительно дольше, чем обычно требуется для восстановления активности вируса после прекращения приема антиретровирусных препаратов. Это говорит о том, что EBT-101 или аналогичные методы лечения CRISPR могут однажды сыграть свою роль в стратегии комбинированного лечения.
“Первоначальные данные исследования EBT-101-001 предоставляют важные клинические доказательства того, что метод редактирования генов может быть безопасно применен для воздействия на резервуары ДНК ВИЧ в клетках человека”, – сказал Прести. “Это исследование дает исследователям бесценную информацию о том, как технология CRISPR может быть применена для борьбы с инфекционными заболеваниями, и стало важным первым шагом на пути к дополнительным программам, направленным на оптимизацию этого метода лечения для миллионов людей, инфицированных ВИЧ и другими инфекционными заболеваниями”.
В настоящее время Excision тестирует более высокую дозу EBT-101 во второй группе и изучает новые методы доставки CRISPR, которые могут быть более эффективными, чем аденоассоциированный вирусный вектор. Одним из возможных вариантов являются липидные наночастицы, подобные тем, которые используются для доставки информационной РНК в вакцинах против COVID-19.
“Вирусный отскок, вероятно, произошел из-за того, что генная терапия не охватила все клетки, содержащие латентный ВИЧ”
Компания также изучает подходы, основанные на CRISPR, для лечения других латентных инфекций. В других презентациях, представленных на конференции на прошлой неделе, исследователи сообщили о многообещающих доклинических результатах экспериментальных методов лечения простого герпеса (EBT-104) и гепатита В (EBT-107). Вирус простого герпеса (ВПГ) сохраняется в нервных клетках, из которых он может реактивироваться и вызывать герпес, генитальный герпес и кератит (воспаление глаз). Вирус гепатита В (HBV) вызывает хроническую инфекцию в печени, которая может привести к циррозу и раку печени. Однако, в отличие от ВИЧ и других ретровирусов, ВПГ и HBV не встраивают свои генетические схемы в хромосомы клеток-хозяев, поэтому их может быть легче удалить.
Мы извлекли много уроков из небольшого числа людей, которые естественным образом контролируют ВИЧ, из несколько большей группы людей, которые контролируют последующее лечение, и из небольшого числа людей, которые вылечились после трансплантации стволовых клеток. Но на данный момент широко применимое функциональное лечение остается долгосрочной перспективой.
Рекомендации
Прести Р. Первое клиническое испытание на людях системного мультиплексного воздействия CRISPR-CA9 на латентный ВИЧ. Американское общество генной и клеточной терапии, Балтимор, 2024 г.
Эксцизионная биотерапия. Компания Excision BioTherapeutics публикует данные о результатах 1/2-й фазы исследования EBT-101 при ВИЧ и данные об эффективности in vivo в отношении вируса герпеса и гепатита В. Пресс-релиз от 13 мая 2024 года.
